CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios no. 199
SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.
Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.
PRACTICAS:
1.-PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA
2.-PRUEBA PARA LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO Y RH, DE LA FORMA DIRECTA,
3.-TPT
4.-TP
PRACTICA 1:
"PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA"
OBJETIVO:
Al termino de la practica el alumno estará capacitado para comprobar indudablemente la tipificación sanguínea.
INTRODUCCIÓN:
El suero del paciente que contiene anticuerpos se pone en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo Ag-Ac, que se manifiesta microscopicamente mediante una aglutinación.
MATERIAL SUSTANCIAS
Pipetas pasteur Eritrocitos lavados A y B conocidos
4 tubos de ensayo Suero del paciente
Gradilla
Centrifuga
PROCEDIMIENTO
1.- Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B se pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3400 r.p.m durante 3 minutos y se decanta el liquido sobrenadante invirtiendo los tubos.
2.- A cada uno de los tubos se añade 1cm de solución salina y se suspenden los globulos rojos.
3.- Se marcan 2 tubos de ensaye, con la letra A y el segundo con la letra B,añadiendo dos gotas de suero.
4.- Añadir a cada tubo una gota de suspención de eritrocitos al 2% (prepara con anterioridad) previamente mezclada, al tubo A suspención "A" y al tubo B suspención "B".
5.- Centrifugar a 1000r.p.m durante 2 minutos.
6.- Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar el resultado.
RESULTADO:
Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene anticuerpos B, el suero que tiene Ag A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a una sangre del grupo B.
Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene anticuerpos B, el suero que tiene Ag B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a una sangre del grupo A.
Si el suero problema aglutina los glóbulos rojos A y B significa que tiene anticuerpos A y B el suero que tiene anticuerpos Ay B corresponden a la sangre o, en consecuencia el suero problema corresponde a una sangre a una sangre del grupo O.
Si el suero problema no aglutina en los glóbulos rojos A y B significa que no tiene anticuerpos ni A ni B, por lo tanto el suero problema pertenece a una sangre del grupo AB.
RESULTADOS DE LA PRUEBA.
En la realización de muestra prueba de laboratorio se llego a la conclusión de que se da el primer caso que ya anteriormente se habían halado tomando en cuenta la aglutinación que se presento en los glóbulos rojos A que esto significa que tiene anticuerpos B y que el suero tiene ag A correspondientes a la sangre B.
CONCLUSIÓN:
ESTA PRUEBA SIRVE PARA BUSCAR Y DETECTAR LOS ANTICUERPOS DE TIPO "A" Y "B" Y QUE SI NO HAY AGLUTINACIÓN EN NINGUNO DE LOS TIPOS YA ANTES MENCIONADOS SE PRESENTA UN TIPO DE SANGRE "O".
PRACTICA 2: "PRUEBA LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO Y RH DE LA FORMA DIRECTA"
OBJETIVO:
Al finalizar la practica el alumno podrá dominar la técnica para la realización de la prueba para determinar el grupo sanguíneo y Rh, empleando la técnica directa (con sangre total) utilizando los antisueros correspondientes para su determinación en el sistema ABO.
INTRODUCCIÓN:
PRINCIPIO
en la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamado antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.
se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H(humana).
Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos mas.
MATERIAL SUSTANCIAS:
Pipetas pasteur Suero Anti-a
6 tubos de ensayo Suero Anti-B
Gradilla Suero Anti-D
Solución isotonica de NaCL al 0.9%
EQUIPO
Centrifuga
PROCEDIMIENTO:
Método de tubo de ensaye:
1.- previa asepsia, practicar venopunción y recoger 1ml de sangre
2.- depositar en un tubo de ensaye, 19 gotas de solución salina y una gota de eritrocitos para formar la suspencion de eritrocitos al 5%.
3.- Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B Rh respectivamente depositar en el tubo "A" dos gotas de suero Anti-"A" , en el tubo "B" dos gotas de Anti-b y en el tubo Rh dos gotas de suero Anti-D.
4.-Añadir a cada tubo una gota de suspencion de eritrocitos al 5%( preparada con anterioridad)
5..- Centrifugar a 1000 r.p.m durante dos minutos
6.- Sacar los tubos y observar inmediatamente la presencia de aglutinación
RESULTADO:
METODOS DE TUBO DE ENSAYE
- Si existe aglutinación en el tubo "A" la sangre es de tipo "A".
- Si existe aglutinación en el tubo "B" la sangre es de tipo "B".
- Si existe aglutinación en el tubo "A" y "B" la sangre es de tipo "AB".
- Si no existe aglutinación en los tubos "A" y "B" la sangre es de tipo "O".
- Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh positivo.
- Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh negativo.
RESULTADO DE LA PRUEBA:
En esta prueba se llego a la conclusión de que el resultado de la prueba era "B" con Rh positivo, ya que existió aglutinación en el tubo "B" y también en el tubo Rh.
CONCLUSIÓN:
EN CONCLUSIÓN ESTA PRUEBA DE LABORATORIO TIENE SIMILITUD CON LA ANTERIOR YA REALIZADA YA QUE EN LAS DOS SE BUSCA EL GRUPO SANQUINEODEL PACIENTE QUE LO NECESITA.
PRACTICA 3: TPT
OBJETIVO:
Que el alumno conozca y lleve a la practica los cocimiento ya adquiridos anteriormente mediante investigaciones, y que el alumno conozca para que se realiza esta prueba y que significan los resultados de la prueba de laboratorio.
INTRODUCCIÓN:
La prueba de Tiempo de Tromboplastina Parcial es un procedimiento de screening universalmente aceptado que se utiliza para detectar anomalías en el sistema intrinseco de coagulación. Puede utilizarse también en pruebas de factores para detectar deficiencias de os factores ll, V, Vll, lX, X, Xl y Xll, pero es insensible al factor plaquetario.
El reactivo de TriniCLOT aPTT S se mezcla con plasma del paciente para proporcionar una cativacion uniforme optima de lamuestra.
MATERIAL:
Baño maria
Tubos de ensayo
Pipetas automatisadas
Centrifuga
Puntillas para pipetas
PROCEDIMIENTO:
- Calentar previamente a 37°C un volumen suficiente de reactivo TrinCLOT aPTT S y CaCl2 TrinCLOT a PTT S.
- etiquetar un tubo de ensayo para cada muestra (paciente y control) a analizar.
- Pipetear 0.1ml de muestra o control al tubo adecuado; a continuacion, pipetear 0.1 ml de reactivo TrinCLOT aPTT S a cada tubo.
- despues de la activación , pipetear inmediatamente a cada tubo 0.1 ml de CaCl TrinCLOT aPTT S previamente calentando,einiciar simultáneamente el cronometraje para la deteccion sde la coagulacion mediante un método de deteccion conveniente.Anotar el tiempo en segundos transcurridos hasta que se detecte la coagulación.
RESULTADO:
En la muestra que se estudio se llego a la conclusion de que la muestra se coagulo en un tiempo de:
1:28 (un minuto y veintiocho segundos).
CONCLUSIÓN:
ESTA PRACTICA NOS SIRVIO PARA PODER CONOCER MAS ADECUADAMENTE Y MAS A FONDO LOS FACTORES DE LA COAGULACIÓN Y COMO ACTÚAN ESTOS MISMOS EN LA DETENCIÓN DE UN SAGRADO.
PRACTICA 4: TP
OBJETIVO:
Que el alumno conozca la similitud del TP y el TPT que son casi igual pero que ambas detectan cosas diferentes al paciente que se realizan con diferentes fines de determinación.
INTRODUCCIÓN:
El fibrinogeno es la proteina precursora de la fibrina que al entrecruzarse se convierte en el componente principal del coagulo de la fibrina. La trombina rompe el fibrinogeno para formar un fenómeno de fibrina . los monomeros de fibrina se unen para formar los polímeros insolubles de la fibrina. Puede haber una deficiencia de fibrinogeno en condiciones tale como afrinogenemia congenita ,hipofigrinemia y en algunos casos de disfrinogenemia.
MATERIAL:
Baño maría
Tubos de ensayo
Pipetas automatizadas
Centrifuga
Puntillas para pipetas
PROCEDIMIENTO:
- Recosntituya el reactivo TrinCLOT Fibrinogeno (reactivo de trombina) y mantengalo a temperatura ambiente (18 -26°C9 durante la prueba.
- Añada 0.2 ml(200ul ) de la muestra de plasma diluida a una copita de Fibrinometro.
- Incube durante 1-3 minutos a 37°C(no mas de 5 minutos )
- Después de la incubación, coloque rápidamente 0.1 ml (100ul) del reactivo TrinCLOT Fibrinogeno (reactivo de trombina) en la copita de fibrinometro y simultáneamente active el cronometro.
- Anote los resultados del tiempo de coagulación en segundos.
RESULTADOS DE LA PRUEBA:
En esta prueba se llego al resultado de que la muestra se coagulo en un tiempo de:
1:07(un minuto y siete segundos)
CONCLUSIÓN:
ESTA PRUEBA NOS SIRVIÓ PARA IR ACUMULANDO CONOCIMIENTOS PARA UN FUTURO MUY PRÓXIMO DONDE UTILIZAREMOS NUEVAMENTE ESTAS PRACTICAS Y LOS CONOCIMIENTO ACERCA DE LOS FACTORES DE LA COAGULACIÓN ASÍ COMO SU CASCADA DE LA MISMA.
MEDIDAS DE SEGURIDAD Y CONTROL: Utilizar células control para la prueba de Coombs. Si no se dispone de células comerciales, sensibiliza glóbulos rojos "O" positivos lavados con solución salina y a una centrifugación de 50% utilice un volumen de estas células y agregue tres volúmenes de suero Anti Rh diluido 1:64.
