PRINCIPIO DEL METODO
La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en ciametahemoglobina.
la intensidad del color formado es proporcional a ka cincentracion de hemoglobina presente en la muestra ensayada.
SIGNIFICADO CLINICO
La hemoglobina es una proteina que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. se encuentra en los globulos rojos y es la encargada del tranporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos.
Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cancer, embarazo,enfermedades renales o hemorragias.
Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatias deshidratacion o estancia en lugares de gran altitud.
El diagnostico clinico debe realizarse teniendon en cuenta todos los datos clinicos y de laboratorio.
REACTIVOS Ferricianuro de potasio 0.60mmol/L
HEMOGLOBINA Cianuro de potasio 77mmol/L
50X Dihifrogeno fosfato de potasio 2mmol/L
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 540 nm
- Cubetas de 1.0 cm de paso de luz
- Equipamiento habitual de laboratorio
MUESTRAS
Sangre apilar o venosa
Usar anticoagulantes como EDTA, heparina u oxalato
Estabilidad de la muestra 1 semana a 2-8°C
PROCEDIMIENTO
1.-Condiciones de ensayo
Longitud de onda..........................540nm
Cubeta.........................................1cm paso de luz
Temperatura.................................15-25°C
2.- Ajustar el espectrofotometro a cero frente a agua destilada
3.- Pipetear
A) METODO MACRO
BLANCO PATRÓN MUESTRA
RT(ml) 5.0 5.0 5.0
Calibrador
(microL) - 2.0 -
Muestra
(microL) - - 2.0
B) METODO MICRO
BLANCO PATRÓN MUESTRA
RT(ml) 2.5 2.5 2.5
Calibrador
(microL) - 10 -
Muestra
(microL) - - 10
4.- Mezclar e incubar 3 minutos as temperatura ambiente (15-25°C)
5.- Leer la absorbancia (A) de calibrador y la muestra, frente al Blanco de reactivo
CALCULOS
- CON FACTOR
(A) Muestra X 36.77= g/dl de hemoglobina en la muestra
- CON PATRÓN
(A) Muestra X 15(Conc. Patrón)=g/dl de hemoglobina en la muestra
(A) Patrón
VALORES DE REFERENCIA
HOMBRES 14-18 g/dl= 8.7-11.2 mmol/L
MUJERES 12-16 g/dl= 7.5-9.9 mmol/L
RESULTADOS
.353 X 15= 15.574 g/dl
.340
COMENTARIO
Por medio de esta practica que se realizo se logro calcular la cantidad de hemoglobina que hay en la sangre del paciente y asi mismo valorarla y llegar a la conclusión que esta dentro de los valores de referencia y se encuentra sano (a) el paciente.
