"ROSA DE BENGALA Y TIEMPO DE SANGRADO"

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.

Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.

PRACTICAS:

"ROSA DE BENGALA Y TIEMPO DE SANGRADO"

Prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas especificas de Brucella (Brucella mellitenis , abortus y suis).

PRINCIPIO:

Se utiliza un antígeno de Brucella abortus biotipo teñido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la detección de aglutininas especificas de Brucella. Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.

REACTIVOS:

Antígeno Rosa de Bengala

Control Positivo de Brucella 

Control Negativo de Brucella

PRECAUCIONES: Únicamente para uso de diagnostico In-vitro.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS:

El reactivo y los controles son estables de 275-281 K (2°-8°) hasta sus respectivas fechas de caducidad.

MATERIAL PROPORCIONADO:

Placa de prueba ( se recomienda que siempre se utilice una placa de vidrio para una mejor observación de los resultados).

Pipetas  desechables

El gotero incluido proporciona una gota de 30-40 ul.

Se sugiere utilizar pipetas automáticas preferentemente.

MATERIAL REQUERIDO (NO PROVISTO):

Cronometro

RECOLECCIÓN DE MUESTRA Y PREPARACIÓN:

Se recomienda que únicamente se utilice suero.

Evite la hemolisis o lipemia de las muestras ya que esto puede inferir con los resultados conservara la muestra de 275-288 K(2-8°C) si no se va a  realizar el estudio en el momento.

PROCEDIMIENTO:

1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo controles y muestras del suero.

2. Utilizando la pipeta automática adiciones 30ul de la muestra del paciente e un circulo de la placa.

3. Mezcle suavemente en Antígeno de Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo después coloque 30ul en la placa de prueba en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador( usar un aplicador diferente para cada muestra de paciente y controles.

4. Agitar la placa con movimiento rotatorios por 4 minutos.

5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante Después de este tiempo la lectura ya no es valida.

RESULTADOS:

La lectura debe llevarse acabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó al mezclar. Este es un tiempo limite optimo en el que se da un tiempo limite optimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se puede omitir, ademas de que se pueden presentar reacciones no especificadas.

*NO AGLUTINACIÓN- Suero  Negativo.

*Cualquier cantidad de Aglutinación-Presencia de anticuerpo específicos. Suero Positivo.

Esta es solo una prueba cualitativa  de screening la cual si resulta positiva  debe ser confirmada  mediante otra prueba cuantitativa para brucelosis como: Aglutinación lenta estandar o Aglutinación lenta en Presencia de ".- Mercapentano..

NOTA: El aislamiento del agente etiologico mediante hemocultivos es de suma importancia .

SENSIBILIDAD: 25 Ul/mL.

RESULTADOS:

MUESTRA 1: No presento AGLUTINACIÓN.

CONCLUSIÓN:

EN ESTA PRACTICA SE REALIZO LA PRUEBA LLAMADA ROSA DE BENGALA QUE NOS SIRVIÓ PARA IR REFORZANDO CONOCIMIENTOS, ESTO CON EL FIN DE ENCONTRAR AGLUTININAS DE BRUCELLA EN DIFERENTES TIPOS UTILIZANDO REACTIVOS ATEMPERADOS PARA SU CORRECTO  DIAGNOSTICO Y ASI EVITAR FALSOS POSITIVOS, CABE MENCIONAR QUE TODAS ESTAS PRUEBAS SE REALIZAN CON TODAS LAS MEDIDAS DE PRECAUCIÓN NECESARIAS. 

"TIEMPO DE SANGRADO"

OBJETIVO

Que al termino de la practica realice el tiempo de sangrado por cualquier de los dos métodos existentes.

INTRODUCCIÓN

Un tiempo de sangrado normal indica una retracción normal de los capilares y la existencia de un numero suficiente de plaquetas, con actividad normal.

La metamorfosis viscosa normal depende de un buen mecanismo extrinseco de producción de tromboplastina, por lo tanto, el tiempo de sangrado se alarga en la insuficiencia del factor  Vll. El tiempo de sangrado aumenta en forma caracteristica en la purpura  trombocitopenica.

METODOLOGÍA

Se utiliza el "Método De Duke"

MATERIAL

Lanceta estéril 

Torundas alcoholadas 

Reloj cronometro

Papel filtro

TÉCNICA

1.- Con una lanceta estéril, se practica en el borde inferior del lóbulo de la oreja una punción de 3mm. de profundidad. Se pone en marca el cronometro.

El borde debe ser profundo, y no debe de abarcar venas visibles.

2.- A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente, sobre la gota de sangre el borde de un pequeño papel filtro, cuidando de no tocar la piel. Esta maniobra por objeto es impedir que se forme coagule la gota de sangre sobre la herida ,pues los tiempos de sangrado resultaran anormalmente bajos.

3.- Utilizando una nueva zona de papel filtro para cada secado de medio minuto, puede tener un registro conveniente del tiempo total (tiempo en minutos = numero de gotas divididas entre dos ) se toma como punto final al momento en el cual el papel filtro ya no absorbe sangre.

TIEMPO DE SANGRADO NORMAL CON EL MÉTODO DE DUKE

De uno a tres minutos (si embargo, puedo ser a veces hasta cinco minutos en sujetos normales).

MÉTODO DE IVY

TÉCNICA 

1. Se coloca alrededor del brazo un manguito de esfindonometro con el cual se ejerce precio de 40 mm. De Hg. Que debe permanecer aquel durante toda la prueba.

2. Utilizando una lanceta estéril se hace a intervalos de cortos tres punciones (entre 2.5 y 3.0 mm de profundidad), a lo  largo de la cara flexora (interna) el antebrazo, evitando las venas visibles. Se pone en marcha el cronometro.

3.- A intervalos  de medio minuto , utilizando papel filtro se seca cuidadosamente cada gota de sangre en la misma forma que para el método  de DUKE, el punto final es el mismo.

 TIEMPO NORMAL DE SANGRADO EN EL MÉTODO DE IVY.

ENTRE 2 Y 6 minutos (máximo de 7 minutos).

NOTA: el tiempo de sangrado representa sencilla y útil (aunque algo imprecisa) de la eficacia de las funciones capilares y de plaquetas  en la hemostasia. Es preferible el método de IVY al de DUKE,pues las condiciones son mas contantes y se realizan en realidad 3 pruebas.

RESULTADOS:

EN EL MÉTODO DE DUKE SE OBTUVO UN TIEMPO DE SANGRADO DE:

2:00 MINUTOS .

EN EL MÉTODO DE IVY SE OBTUVO UN TIEMPO DE SANGRADO DE:

3:35 MINUTOS.

CONCLUSIÓN:

EN ESTA PRACTICA SE ESTUDIO EL TIEMPO DE SANGRADO DE UN PACIENTE ESTO CON EL FIN DE OBTENER LA INFORMACIÓN NECESARIA CON EL OBJETIVO DE CONOCER LA RETRACCIÓN CAPILAR ASÍ COMO LA CANTIDAD SUFICIENTE DE PLAQUETAS EN EL ORGANISMO DE PACIENTE, OBTENIENDO UNOS RESULTADOS FAVORABLES.