PRUEBA DE LA DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO DE LA FORMA INVERSA, PRUEBA PARA LA DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO Y RH, DE LA FORMA DIRECTA, TPT Y TP

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios no. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.

Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.

PRACTICAS:

1.-PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA

2.-PRUEBA PARA LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO Y RH, DE LA FORMA DIRECTA,

3.-TPT 

 4.-TP

PRACTICA 1:

"PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA"

OBJETIVO:

Al termino de la practica el alumno estará capacitado para comprobar indudablemente la tipificación sanguínea.

INTRODUCCIÓN:

El suero del paciente que contiene anticuerpos se pone en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo Ag-Ac, que se manifiesta microscopicamente mediante una aglutinación.

MATERIAL                                                                                                  SUSTANCIAS

Pipetas pasteur                                                                              Eritrocitos lavados A y B conocidos

4 tubos de ensayo                                                                          Suero del paciente

Gradilla

Centrifuga

PROCEDIMIENTO

1.- Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B se pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3400 r.p.m durante 3 minutos y se decanta el liquido sobrenadante invirtiendo los tubos.

2.- A cada uno de los tubos se añade 1cm de solución salina y se suspenden los globulos rojos.

3.- Se marcan 2 tubos de ensaye, con  la letra A y el segundo con la letra B,añadiendo dos gotas de suero.

4.- Añadir a cada tubo una gota de suspención de eritrocitos al 2% (prepara con anterioridad) previamente mezclada, al tubo A suspención "A" y al tubo  B suspención "B".

5.- Centrifugar a 1000r.p.m durante 2 minutos.

6.- Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar el resultado.

RESULTADO:

Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene anticuerpos B,  el suero que tiene Ag A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a una sangre del grupo B.

Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene anticuerpos B, el suero que tiene Ag B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a una sangre del grupo A.

Si el suero problema aglutina los glóbulos rojos A y B significa que tiene anticuerpos A y B el suero que tiene anticuerpos Ay B corresponden a la sangre o, en consecuencia el suero problema corresponde a una sangre a una sangre del grupo O.

Si el suero problema no aglutina en los glóbulos rojos A y B significa que no tiene anticuerpos ni A ni B, por lo tanto el suero problema pertenece a una sangre del grupo AB.

 

RESULTADOS DE LA PRUEBA.

En la realización de muestra prueba de laboratorio se llego a la conclusión de que se da el primer caso que ya anteriormente se habían halado tomando en cuenta la aglutinación que se presento en los glóbulos rojos A que esto significa que tiene anticuerpos B y que el suero tiene ag A correspondientes a la sangre B.

CONCLUSIÓN:

ESTA PRUEBA SIRVE PARA BUSCAR Y DETECTAR LOS ANTICUERPOS DE TIPO "A" Y "B" Y QUE SI NO HAY AGLUTINACIÓN EN NINGUNO DE LOS TIPOS YA ANTES MENCIONADOS SE PRESENTA UN TIPO DE SANGRE "O".

PRACTICA 2: "PRUEBA LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO Y RH DE LA FORMA DIRECTA"

OBJETIVO: 

Al finalizar la practica el alumno podrá dominar la técnica para la realización de la prueba para determinar el grupo sanguíneo y Rh, empleando la técnica directa (con sangre total) utilizando los antisueros correspondientes para su determinación en el sistema ABO.

INTRODUCCIÓN:

PRINCIPIO

en la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamado antígenos que representan los llamados grupos o  factores sanguíneos.

se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H(humana).

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos mas.

MATERIAL                                                                                        SUSTANCIAS:

Pipetas pasteur                                                                           Suero Anti-a

6 tubos de ensayo                                                                       Suero Anti-B 

Gradilla                                                                                       Suero Anti-D

                                                                                                   Solución isotonica de NaCL al 0.9%

EQUIPO

Centrifuga

PROCEDIMIENTO:

Método de tubo de ensaye:

1.- previa asepsia, practicar venopunción  y recoger 1ml de sangre

2.- depositar en un tubo de ensaye, 19 gotas de solución salina y una gota de eritrocitos para formar la suspencion de eritrocitos al 5%.

3.- Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B Rh respectivamente depositar en el tubo "A" dos gotas de suero Anti-"A" , en el tubo "B" dos gotas de Anti-b y en el tubo Rh dos gotas de suero Anti-D.

4.-Añadir a cada tubo una gota de suspencion de eritrocitos al 5%( preparada con anterioridad)

5..- Centrifugar a 1000 r.p.m durante dos minutos

6.- Sacar los tubos y observar inmediatamente la presencia de aglutinación 

RESULTADO:

METODOS DE TUBO DE ENSAYE

1. Si existe aglutinación en el tubo "A" la sangre es de tipo "A".
2. Si existe aglutinación en el tubo "B" la sangre es de tipo "B".
3. Si existe aglutinación en el tubo "A" y "B" la sangre es de tipo "AB".
4. Si no existe aglutinación en los tubos "A" y "B" la sangre es de tipo "O".
5. Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh positivo.
6. Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh negativo.

RESULTADO DE LA PRUEBA:

En esta prueba se llego a la conclusión de que el resultado de la prueba era "B" con Rh positivo, ya que existió aglutinación en el tubo "B" y también en el tubo Rh.

CONCLUSIÓN:

EN CONCLUSIÓN ESTA PRUEBA DE LABORATORIO TIENE SIMILITUD CON LA ANTERIOR YA REALIZADA YA QUE EN LAS DOS SE BUSCA EL GRUPO SANQUINEODEL PACIENTE QUE LO NECESITA.

PRACTICA 3:  TPT

OBJETIVO:

Que el alumno conozca y lleve a la practica los cocimiento ya adquiridos anteriormente mediante investigaciones,  y que el alumno conozca para que se realiza esta prueba y que significan los resultados de la prueba de laboratorio.

INTRODUCCIÓN:

La prueba de Tiempo de Tromboplastina Parcial es un procedimiento de screening universalmente aceptado que se utiliza para detectar anomalías en el sistema intrinseco de coagulación. Puede utilizarse también en pruebas de factores para detectar deficiencias de os factores ll, V, Vll, lX, X, Xl y Xll, pero es insensible al factor plaquetario.

El reactivo de TriniCLOT aPTT S se mezcla con plasma del paciente para proporcionar una cativacion uniforme optima de lamuestra.

MATERIAL:

Baño maria

Tubos de ensayo

Pipetas automatisadas

Centrifuga

Puntillas para pipetas

 

PROCEDIMIENTO:

1. Calentar previamente a 37°C un volumen suficiente de reactivo TrinCLOT aPTT S y CaCl2 TrinCLOT a PTT S.
   
2. etiquetar un tubo de ensayo para cada muestra (paciente y control) a analizar.
3. Pipetear 0.1ml de muestra o control al tubo adecuado; a continuacion, pipetear 0.1 ml de reactivo TrinCLOT aPTT S a cada tubo.
   
4. despues de la activación , pipetear inmediatamente a cada tubo 0.1 ml de CaCl TrinCLOT aPTT S previamente calentando,einiciar simultáneamente el cronometraje para la deteccion sde la coagulacion mediante un método de deteccion conveniente.Anotar el tiempo en segundos transcurridos hasta que se detecte la coagulación.

RESULTADO:

En la muestra que se estudio se llego a la conclusion de que la muestra se coagulo en un tiempo de:

1:28 (un minuto y veintiocho segundos).

CONCLUSIÓN:

ESTA PRACTICA NOS SIRVIO  PARA PODER CONOCER MAS ADECUADAMENTE Y MAS A FONDO LOS FACTORES DE LA COAGULACIÓN Y COMO ACTÚAN ESTOS MISMOS EN LA DETENCIÓN DE UN SAGRADO.

PRACTICA 4: TP 

OBJETIVO:

Que el alumno conozca la similitud del TP y el TPT que son casi igual pero que ambas detectan cosas diferentes al paciente que se realizan con diferentes fines de determinación.

INTRODUCCIÓN:

El fibrinogeno es la proteina precursora de la fibrina que al entrecruzarse se convierte en el componente principal del coagulo de la fibrina. La trombina rompe el fibrinogeno para formar un fenómeno de fibrina . los monomeros de fibrina se unen para formar los polímeros insolubles de la fibrina. Puede haber una deficiencia de fibrinogeno en condiciones tale como afrinogenemia congenita ,hipofigrinemia y en algunos casos de disfrinogenemia.

MATERIAL:

Baño maría

Tubos de ensayo

Pipetas automatizadas

Centrifuga

Puntillas para pipetas

 

PROCEDIMIENTO:

1. Recosntituya el reactivo TrinCLOT Fibrinogeno (reactivo de trombina) y mantengalo a temperatura ambiente (18 -26°C9 durante la prueba.
2. Añada 0.2 ml(200ul ) de la muestra de plasma diluida a una copita de Fibrinometro.
3. Incube durante 1-3 minutos  a 37°C(no mas de 5 minutos )
4. Después de la incubación, coloque rápidamente 0.1 ml (100ul) del reactivo TrinCLOT Fibrinogeno (reactivo de trombina) en la copita de fibrinometro y simultáneamente active el cronometro.
5. Anote los resultados  del tiempo de coagulación en segundos.

RESULTADOS DE LA PRUEBA:

En esta prueba se llego al resultado de que la muestra se coagulo en un tiempo de:

1:07(un minuto y siete segundos)

CONCLUSIÓN:

ESTA PRUEBA NOS SIRVIÓ PARA IR ACUMULANDO CONOCIMIENTOS PARA UN FUTURO MUY PRÓXIMO DONDE UTILIZAREMOS NUEVAMENTE ESTAS PRACTICAS Y LOS CONOCIMIENTO ACERCA DE LOS FACTORES DE LA COAGULACIÓN ASÍ COMO SU CASCADA DE LA MISMA.

"Bio-HBsAG"

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios no. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.

Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.

PRACTICA:

"Bio-HBsAG"

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba "Bio-HBsAG"en tira esta diseñada para la detección rápida cualitativa del Antígeno de Superficie  Hepatitis B en Suero Humano.

RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA 

La hepatitis B es una de las mayores causas de hepatitis en la poblacion mundial. Las personas que son portadoras del virus pueden ser fuentes de infección.

Esta prueba esta elaborada a partir de tecnología de inmunoensayo cromatografico de flujo lateral conteniendo una membrana filtrante pre-impreganada con anticuerpos "Anti-HBsAG" y reactivos de oro coloidal activados con anticuerpos "Anti-HBsAG". En la prueba de tira existen dos regiones a lo largo de la membrana , la zona en donde se obtiene el Resultado, denominada región Test "T" y la región de Control "C" , donde se verifica que el desarrollo de la prueba haya sido satisfactorio.

En la región test "T" aparecerá una linea de color rojiza como resultado de la presencia de  Bio-HBsAg en la muestra evaluada . En caso contrario no aparecerá ninguna linea en dicha región . En la región de Control "C" siempre aparecerá una linea de color rojiza independientemente de una resultados positivo o negativo, como indicador interno de control de calidad de la prueba para verificar que esta se realizo adecuadamente.

MATERIAL

-Equipo de "Bio-HBsAG"

-Pipetas desechables

PRECAUCIONES 

1. Este equipo es para uso de diagnostico in-vitro.

2. Este equipo es exclusivamente para uso profesional 

3. No pipete el material con la boca. No fume coma o beba en áreas donde se encuentre el producto.

4. las personas que llevan acabo la prueba deberán utilizar bata y guantes desechables al momento de tomar la muestra y llevar acabo la prueba lavando muy bien sus mano después de realizada la prueba 

5. Utilice una punta de pipeta desechable para cada prueba 

6. Todos lo derramen de líquidos deberan ser limpiados con hipoclorito de sodio o equivalente 

7. Maneja la muestra y el material baja procedimiento rutinarios de tratamiento de agentes infecciosos.

8. Evite contacto directo de manos con ojos y nariz durante la recolección de muestra y desarrollo de la prueba.

DESARROLLO DE LA PRUEBA

1. Saque la tire del sobre y coloquela en una área de trabajo adecuada

2. Codifique la tire utilizada para que coincida con los datos de la muestra del paciente 

3. Coloque suficiente suero en el micro contenedor, recomendando la utilización de un recipiente plástico desechable de 10 mm

4. Tome la tira e introduzca el extremo que tendra contacto con el suero, teniendo precaución de que no se sumerja mas aya de la linea delimitada por las flechas

5. Resultados altamente positivos aparecerá apartir del segundo o tercer minuto. Muestras positivas conteniendo una menos concentración de postividad podrán tardar hasta 15 minutos en aparecer. No interprete resultados después de transcurrido 30 minutos.

Limpie profundamente el área de trabajo después de haber echo las pruebas con hipoclorito de sodio o equivalente.

RESULTADO:

EN ESTA PRUEBA QUE SE REALIZO SE LLEGO A LA CONCLUSIÓN DE QUE EL PACIENTE NO PRESENTABA ANTÍGENOS DE SUPERFICIE DE HEPATITIS "B" YA QUE SOLO SE COLOREO LA ZONA DE CONTROL Y NO LA DE TEST.

CONCLUSIÓN:

ESTA PRUEBA DE LABORATORIO NOS AYUDO PARA CONOCER COMO SE REALIZABA LA PRUEBA DE HEPATITIS "B" Y QUE AFORTUNADAMENTE EL PACIENTE NO PRESENTABA ANTÍGENOS DE SUPERFICIE DE HEPATITIS "B".

"PRUEBA DE VIH"

 CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios no. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.

Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.

PRACTICA:

DETERMINE 

HIV-1/2

NOMBRE Y FINALIDAD DE USO:

Determine "HIV 1/22" es un inmunoanalisis cualitativo in vitro de lectura visual para la detección  de anticuerpos de los virus  VIH-1 y VIH 2 en suero plasma o sangre hematica . Esta practica esta indicada como ayuda de la detección de anticuerpos al VIH 1/ VIH" en muestras de individuos infectados

OBJETIVO:

Que el alumno pueda conocer la reacción en placa ante anticuerpos de VIH 1 y VIH 2 en suero del paciente infectado ademas de conocer las precauciones necesarias al manejar esas muestras qeu son consideradas de alto riesgo.

INTRODUCCIÓN:

El VIH es un virus que afecta a una cierta cantidad de la población mundial, comparte con los retrovirus las características esenciales de esa familia. Elvirión contiene información genética bajo la forma de ácido ribonucléico (ARN), protegido por una envoltura de membrana. 

Ademas se conoce que esta enfermedad baja las defensas inmunologicas del afectado y que esto lo puede llevar a la muerte a una edad temprana o también ya en una edad adulta.

MATERIAL:

-equipo de prueba para la prueba

-pipeta 

-muestra sanguínea

ADVERTENCIAS:

-Utilice guantes

-No pipete con la boca

-No coma , no bebe, cosméticos y no utilice lentes de contacto en el area donde se realiza la prueba.

-Limpie y desinfecte las salpicaduras de la muestra en el área de trabajo.

-deseche correctamente todo el material utilizado para esta prueba.

PROCEDIMIENTO:

1.- Retire el plástico de  protección de los ensayos.

2.- Para muestras de suero o plasma. 

a. Dispense 50 ul de muestra (con una pipeta de presición ) en la superficie absorbente (señalada con una flecha).

b. Esperar entre un mínimo de 15 minutos y un máximo de 60 minutos para leer el resultado .

3.- Para muestras de sangre (venopuncion):

a.Dispense 50 ul de muestra ( con una pipeta de presición ) en la superficie absorbente (señala con una flecha)

b. Espere un minuto y dispense  una gota de tapón de arrastre en la superficie absorbente.

c. Espere un minuto de 15  minutos y un máximo de 60 minutos para leer el resultado

4.- para muestras de sangre (punción digital)

a. Dispense 50 ul de muestra con tubo capilar con EDTA) en la superficie absorbente (señalada con una flecha)

b. Espera hasta la sangre impregne totalmente la superficie absorbente ya a continuación dispense una gota de tapón de arrastre en la superficie absorbente.

c. Espere entre un mínimo de 15 minutos y un máximo de 60 minutos para leer el resultado..

RESULTADOS

EN ESTA PRUEBA SE LLEGO AL RESULTADO QUE LA MUESTRA DEL PACIENTE QUE SE ESTABA ANALIZANDO RESULTO POSITIVA Y ESTO NOS QUIERE DECIR QUE EL PACIENTE YA ESTA PRESENTANDO LOS SÍNTOMAS DEL VIRUS QUE AFECTA EL SISTEMA INMUNOLÓGICO DEL PACIENTE.

CONCLUSIÓN:

CON ESTA PRUEBA SE ESTUDIO UNA FORMA EN LA QUE SE PUEDEN LOCALIZAR ANTICUERPOS DE VIH 1 Y VIH 2 ADEMAS DE CONOCER OTRA FORMA DISTINTA DE REALIZAR EL EXAMEN QUE ANTERIORMENTE YA SE HABÍA  HABLADO.

"PRUEBA DE RUMPEL. LEEDE" Y "RETRACCION DE COAGULO"

   CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios no. 199

"EMILIZANO ZAPATA SALAZAR"

SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.

Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.

PRACTICAS:

"PRUEBA DE RUMPEL. LEEDE" Y "RETRACCION DE COAGULO"

OBJETIVO:

Que el alumno logre realizar la prueba del torniquete satisfactoriamente con el fin de poder identificar petequias en una zona identificada del brazo del paciente manteniendo una precion en el mismo durante 5 minutos.

INTRODUCCION:

Las petequias son pequeñas manchas de una coloracion rojiza formadas por extravasación de un número pequeño formadas por extravasación de un número pequeño de eritrocitos cuando se daña un capilar. Estas mismas son pequeños derrames vasculares cutáneos del tamaño de una cabeza de alfiler.

MATERIAL

-Torniquete o manguito inflable del tenciometro.

- Marcador

-Cronometro

PROCEDIMIENTO

Consiste en mantener elevada la presion en un miembro por un periodo de 5 minutos, con un lazo o el manguito inflable del tensiometro como para medir la T.A y comprimirlo con una presión menor que la sistolica pero mayor que la diastolica para producir estasis sanguinea en las venulas capilares.

material a estudiar: observcion de la piel luego de interrumpir la circulatorio venosa. Se realiza el recuento de las petequias (pequeñas manchas hemorragicas en un circulo de 5 cm de diámetro) normalmente no se debe producir mas de 5 petequias por debajo de la coprencion , especialmente en la cara palmar del antebrazo próxima al manguito neumático. Mas de diez petequias , y sobre todo extendidas mas allá del cuarto superior del antebrazo  es patológico.

Preparación previa:

no es necesaria. No repeteir en el mismo miembro antes de los 7 días.

RESULTADOS:

Valores normales: ninguna petequia o hasta diez petequias en un área de 5 cm, Escala para informar en numero de petequias:

0 A 10= 1 +

10 A 20= 2 +

20 A 50= 3 +

50 o mas petequias = 4 +

valores aumentados: pueden indicar coagulación intravascular difusa, disminución del fibrinogeno, disminución de la protrombina, deficiencia del factor Vll, trombiocitopenia, tromboastenia  enfermedad de von Willebrand, deficiencia de vitamina K . Y puede estar asociado a afecciones no relacionadas con los trastornarnos de la coagulación como: escarlatina , hipertension , diabetes, gripe, sarampion, escorbuto.

Tambien es anormal la prueba en las trombopatias quiza debido a que por falla plaquetaria no hay vasoconstriccion adecuada ni formacion de trombo blanco.

Confiabilidad de los resultados: Buena

Medicamentos que pueden alterar los resultados: Corticoesteroides.

RESULTADOS:

3 PETEQUIAS EN UN CIRCULO CON UN  RADIO DE 5 CM (+)

CONCLUSIÓN:

EN ESTA PRUEBA SE PUEDO LOCALIZAR PETEQUIAS QUE SE FORMARON POR APLICAR PRESIÓN AL BRAZO DEL PACIENTE CON EL FIN DE DIAGNOSTICAR LA FRAGILIDAD DE LAS PAREDES CAPILARES.

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios no. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

PRACTICA:

"RETRACCIÓN DEL COAGULO"

OBJETIVO:Al termino de la practica el alumno sera capaz de realizar a interpretar la prueba de R.C

INTRODUCCIÓN: Puesto que el coagulo de fibrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de glóbulos rojos establece el limite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coagulo se retrae tanto mas cuanto menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al numero de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coagulo se modifica en los trastornos de este tipo: choque, quemaduras, etc.

mide la cantidad de fibrina formada y su retraccion; asi como al numero de funcion de las plaquetas, pues poseen una proteína similar a la actomisina, que produce la retracción del coagulo.

MATERIAL:

-Tubos de ensaye para centrifuga 

-Alambre de 1mm. de grosor

-Baño Maria de 37ºC

-Equipo de venopuncion.

TÉCNICA

1.- Se pone en un tubo de centrifuga graduado de 5 ml. de sangre venosa recién obtenida. Se lleva el alambre al fondo del tubo.

2.- Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37 ºC en donde se deja 1hr. Después de la formación del coagulo sin tocarlo.

3.- Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurrir dentro del tubo el coagulo unido al alambre durante 1 a 2 min.

4.- Se lee el volumen del liquido que quedo en el tubo. El resultado se expresa como un porcentaje del volumen inicial de 5 ml.

Ejemplo: Si después de la coagulación 5 ml. De sangre suministraron 3 ml. de liquido.

La retracción es de :; 3X100= 60 por ciento.

                                                                                      5

VALORES NORMALES:

ENTRE 48 Y 64 POR CIENTO.

RESULTADOS:

1ER MUESTRA:    2ML      2X100= 40%  (POR DEBAJO DE LOS VALORES DE REFERENCIA)

                                                     5

2ª MUESTRA: 2.5 ML          2.5X100=50%  (DENTRO DE LOS VALORES NORMALES DE REFERENCIA)

                                                       5

CONCLUSIÓN:

CON ESTA PRACTICA DE PUDO ESTUDIAR EL LIMITE INFERIOR DE LA RETRACCIÓN DE LA FIBRINA. EN NUESTROS RESULTADOS SE PUEDE OBSERVAR QUE HAY UN RESULTADO QUE NO ESTA DENTRO DE LOS VALORES DE REFERENCIA 

"ROSA DE BENGALA Y TIEMPO DE SANGRADO"

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

SUBMODULOS: Realiza análisis hematologicos de serie blanca y hemostasia.

Analiza y fracciona sangre con fines transfucionales.

PRACTICAS:

"ROSA DE BENGALA Y TIEMPO DE SANGRADO"

Prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas especificas de Brucella (Brucella mellitenis , abortus y suis).

PRINCIPIO:

Se utiliza un antígeno de Brucella abortus biotipo teñido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la detección de aglutininas especificas de Brucella. Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.

REACTIVOS:

Antígeno Rosa de Bengala

Control Positivo de Brucella 

Control Negativo de Brucella

PRECAUCIONES: Únicamente para uso de diagnostico In-vitro.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS:

El reactivo y los controles son estables de 275-281 K (2°-8°) hasta sus respectivas fechas de caducidad.

MATERIAL PROPORCIONADO:

Placa de prueba ( se recomienda que siempre se utilice una placa de vidrio para una mejor observación de los resultados).

Pipetas  desechables

El gotero incluido proporciona una gota de 30-40 ul.

Se sugiere utilizar pipetas automáticas preferentemente.

MATERIAL REQUERIDO (NO PROVISTO):

Cronometro

RECOLECCIÓN DE MUESTRA Y PREPARACIÓN:

Se recomienda que únicamente se utilice suero.

Evite la hemolisis o lipemia de las muestras ya que esto puede inferir con los resultados conservara la muestra de 275-288 K(2-8°C) si no se va a  realizar el estudio en el momento.

PROCEDIMIENTO:

1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo controles y muestras del suero.

2. Utilizando la pipeta automática adiciones 30ul de la muestra del paciente e un circulo de la placa.

3. Mezcle suavemente en Antígeno de Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo después coloque 30ul en la placa de prueba en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador( usar un aplicador diferente para cada muestra de paciente y controles.

4. Agitar la placa con movimiento rotatorios por 4 minutos.

5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante Después de este tiempo la lectura ya no es valida.

RESULTADOS:

La lectura debe llevarse acabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó al mezclar. Este es un tiempo limite optimo en el que se da un tiempo limite optimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se puede omitir, ademas de que se pueden presentar reacciones no especificadas.

*NO AGLUTINACIÓN- Suero  Negativo.

*Cualquier cantidad de Aglutinación-Presencia de anticuerpo específicos. Suero Positivo.

Esta es solo una prueba cualitativa  de screening la cual si resulta positiva  debe ser confirmada  mediante otra prueba cuantitativa para brucelosis como: Aglutinación lenta estandar o Aglutinación lenta en Presencia de ".- Mercapentano..

NOTA: El aislamiento del agente etiologico mediante hemocultivos es de suma importancia .

SENSIBILIDAD: 25 Ul/mL.

RESULTADOS:

MUESTRA 1: No presento AGLUTINACIÓN.

CONCLUSIÓN:

EN ESTA PRACTICA SE REALIZO LA PRUEBA LLAMADA ROSA DE BENGALA QUE NOS SIRVIÓ PARA IR REFORZANDO CONOCIMIENTOS, ESTO CON EL FIN DE ENCONTRAR AGLUTININAS DE BRUCELLA EN DIFERENTES TIPOS UTILIZANDO REACTIVOS ATEMPERADOS PARA SU CORRECTO  DIAGNOSTICO Y ASI EVITAR FALSOS POSITIVOS, CABE MENCIONAR QUE TODAS ESTAS PRUEBAS SE REALIZAN CON TODAS LAS MEDIDAS DE PRECAUCIÓN NECESARIAS. 

"TIEMPO DE SANGRADO"

OBJETIVO

Que al termino de la practica realice el tiempo de sangrado por cualquier de los dos métodos existentes.

INTRODUCCIÓN

Un tiempo de sangrado normal indica una retracción normal de los capilares y la existencia de un numero suficiente de plaquetas, con actividad normal.

La metamorfosis viscosa normal depende de un buen mecanismo extrinseco de producción de tromboplastina, por lo tanto, el tiempo de sangrado se alarga en la insuficiencia del factor  Vll. El tiempo de sangrado aumenta en forma caracteristica en la purpura  trombocitopenica.

METODOLOGÍA

Se utiliza el "Método De Duke"

MATERIAL

Lanceta estéril 

Torundas alcoholadas 

Reloj cronometro

Papel filtro

TÉCNICA

1.- Con una lanceta estéril, se practica en el borde inferior del lóbulo de la oreja una punción de 3mm. de profundidad. Se pone en marca el cronometro.

El borde debe ser profundo, y no debe de abarcar venas visibles.

2.- A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente, sobre la gota de sangre el borde de un pequeño papel filtro, cuidando de no tocar la piel. Esta maniobra por objeto es impedir que se forme coagule la gota de sangre sobre la herida ,pues los tiempos de sangrado resultaran anormalmente bajos.

3.- Utilizando una nueva zona de papel filtro para cada secado de medio minuto, puede tener un registro conveniente del tiempo total (tiempo en minutos = numero de gotas divididas entre dos ) se toma como punto final al momento en el cual el papel filtro ya no absorbe sangre.

TIEMPO DE SANGRADO NORMAL CON EL MÉTODO DE DUKE

De uno a tres minutos (si embargo, puedo ser a veces hasta cinco minutos en sujetos normales).

MÉTODO DE IVY

TÉCNICA 

1. Se coloca alrededor del brazo un manguito de esfindonometro con el cual se ejerce precio de 40 mm. De Hg. Que debe permanecer aquel durante toda la prueba.

2. Utilizando una lanceta estéril se hace a intervalos de cortos tres punciones (entre 2.5 y 3.0 mm de profundidad), a lo  largo de la cara flexora (interna) el antebrazo, evitando las venas visibles. Se pone en marcha el cronometro.

3.- A intervalos  de medio minuto , utilizando papel filtro se seca cuidadosamente cada gota de sangre en la misma forma que para el método  de DUKE, el punto final es el mismo.

 TIEMPO NORMAL DE SANGRADO EN EL MÉTODO DE IVY.

ENTRE 2 Y 6 minutos (máximo de 7 minutos).

NOTA: el tiempo de sangrado representa sencilla y útil (aunque algo imprecisa) de la eficacia de las funciones capilares y de plaquetas  en la hemostasia. Es preferible el método de IVY al de DUKE,pues las condiciones son mas contantes y se realizan en realidad 3 pruebas.

RESULTADOS:

EN EL MÉTODO DE DUKE SE OBTUVO UN TIEMPO DE SANGRADO DE:

2:00 MINUTOS .

EN EL MÉTODO DE IVY SE OBTUVO UN TIEMPO DE SANGRADO DE:

3:35 MINUTOS.

CONCLUSIÓN:

EN ESTA PRACTICA SE ESTUDIO EL TIEMPO DE SANGRADO DE UN PACIENTE ESTO CON EL FIN DE OBTENER LA INFORMACIÓN NECESARIA CON EL OBJETIVO DE CONOCER LA RETRACCIÓN CAPILAR ASÍ COMO LA CANTIDAD SUFICIENTE DE PLAQUETAS EN EL ORGANISMO DE PACIENTE, OBTENIENDO UNOS RESULTADOS FAVORABLES.

  

"VDRL-USR"

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios  No. 199
                                           "EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

"VDRL-USR"

Antigeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sifilis en suero sin inactivar, en Plasma y L.C.R (no requiere reconstitucion)

Agente de Diagnostico

Itroduccion:

La sifilis es una enfermedad generalizada, producida por treponema pallidum, trasmitida habitualmente por contacto sexual.

El diagnostico descnsa en la serologia: los metodos determinan dos clases de anticuerpos: 1) Tipo "cardiolipina" no treponema e inespecificos  y 2) Los antitreponemas especificos. La facilidad para su determinacion ha hecho que los del tipo cardiolipina se utilicen universalmente en las exploraciones iniciales ya sean examenes individuales o encuestas de poblacion: la variantes tecnica mas comunmente empleada es la llamada VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) que determina la floculacion en placa (cuantitativa) del antígeno con cardiolipina y lectina.

Reactivos y material proporcionado

-Antígeno en suspencion estabilizado (VDRL)

-Control positivo

-Control negativo

-Aguja No.21 sin bisel

-Pipetas desechables (unicamente para presentaciones de 100 pruebas).

Estabilidad y almacenamiento del reactivo

El antigeno de VDRL y los sueros controles son estables hasta su fecha de caducidad indicada en la etiquetas cuando se almacena de 2 a a 8°C No congelar.

Material y equipo necesario no proporcionado

-Placa concava (indispensable)

-Agitador mecanico

-Cronometro

-Microscopio

Obtención de la muestra

1.Obtener 3.0 ml de sangre por puncion venosa

2. Centrifugar y separar el suero

Método cualitativo:

1. En un anillo de una placa concava deposite 0.05 mL de suerro problema

2. En anillos diferentes colocar una gota se suero control positivo y en otra por separado una gota de control negativo, extender sobre la superfice del anillo.

3. Añadir una gota del antigeno en supencion estabilizado previamente suspendido, en cada una de las muestras utilizando la aguja No. 21 sin bisel.

4. Colocar la placa sobre un agitador mecanico a 180 rpm DURANTE 4 MINUTOS. Las pruebas realizadas en un clima extremadamente seco puede provocar la evaporacion de las muestras , por lo tanto, la placa en rotacion puede ser cubierta con una tapa de caja petri humedecida con una gasa

5. Leer inmediatamente al microscopio con Objetivo y Ocular 10 X.

Interpretación:

Control Positivo

Presencia de floculacion mediana o grande

Control Negativo

Ausencia de floculacion

RESULTADOS:

En esta prueba se analizaron muestras que salieron negativas en la prueba VDRL que esto indica que el paciente no a estado en contacto con treponema pallidum.

pero se observaron tambien que presento aglutinacion en la prueba que esto indica que el paciente si esta contagiado con treponema pallidum.

CONCLUSIÓN:

Con esta prueba pudimos observar la aglutinación que se presenta con la presencia de treponema pallidum  que desafortunadamente afecta a muchas personas que han estado en contacto con personas contagiadas.